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枯草芽孢杆菌的发酵过程

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发布时间:2017-09-26

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枯草芽孢杆菌作为微生物菌剂中最常用的菌种,市场的需求量很大,现在简单介绍一下枯草芽孢杆菌的生产工艺。   一、菌种   枯草芽孢杆菌的种类繁多,根据产生代谢产物不同可以分为:产***枯草芽孢杆菌、产蛋白酶枯草芽孢杆菌等。   原始菌种一般用甘油管保藏在超低温冰箱中,可以保藏2-3年。需要时,取出进行活化,一般用斜面培养基活化后,斜面放置到冰箱中保存。斜面培养基中的菌种进行一次扩大培养,转移到茄子瓶培养基中,再把茄子瓶培养基中的菌种制作成菌悬浊液,菌种制作完成。   二、三级深层液态发酵   种子罐使用前应当进行空转杀菌,通常121℃以上,1.5兆帕,30min。冷却后,配料,按比例将所需物料投入种子罐中,搅拌均匀。再次对种子罐和物料进行杀菌,同时对空气过滤器及各个接触阀门管道进行灭菌。   灭菌完成后,通入无菌空气,冷却降温,等待接种。接种,将菌悬浊液接入到种子罐中。通常使用火焰接种法,操作简单、省时,但接触空气,操作不当容易导致染菌。比较安全的一种方法,压差法接种。特制的接种瓶,依靠控制种子罐中的压力降菌悬浊液吸入种子罐中,避免了与空气的接触,操作比较复杂。   接种完成后,就是枯草芽孢杆菌的生长过程。一般微生物生长都需要周期,枯草芽孢杆菌也是一样的。微生物培养过程(生长期)分为四个时期。   1、调整期,也叫适应期、迟滞期。微生物进入新的生长环境后,需要一段时间适应环境。此时期,微生物生长缓慢,OD值(菌密度值)基本不变。   2、对数生长期,也叫对数期。此阶段,微生物由于已经适应了生长环境,加之培养基内营养丰富,微生物排出的有害物质少,对微生物生长繁殖的影响小,微生物进入迅速生长和大量繁殖阶段。OD值基本呈对数增加。   3、平衡期,也叫稳定期。经过一段时间的高速生长繁殖后,培养基内部营养物质消耗越来越大,有害物质逐渐积累,微生物生长繁殖受限,菌体出现死亡,新繁殖的个体数量与死亡数量趋于平衡,OD值趋于稳定。   4、衰亡期。培养基营养物质消耗殆尽,有害物质大量积累,微生物已不能正常生长繁殖,菌体大量死亡。OD值出现明显下降。   通常,枯草芽孢杆菌的生产是为了得到较高数量的活菌,一般等产生较多的芽孢时进行转罐,转入二级罐中,继续培养。   二级罐发酵完成后,转入发酵罐,在发酵罐中生长至90%以上芽孢时,放罐。

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